純化設(shè)備的選擇

      簡單的緩沖液交換和除鹽步驟可以使用注射器或者外周蠕動泵和預(yù)制的HiTrap柱子一起進(jìn)行。如果進(jìn)行高分辨率分離，就需要色譜系統(tǒng)（AKTA、HPLC等）來精確的控制流速。

Cytiva的凝膠過濾產(chǎn)品家族

· Sephadex

Sephadex系列填料誕生于1959年，是Cytiva最早的凝膠過濾填料產(chǎn)品系列。按照填料基架交聯(lián)度的不同，產(chǎn)品名稱用Sephadex G加數(shù)字來區(qū)別 (如G-10、G-15等)，數(shù)字越小交聯(lián)度越大，形成的平均孔徑越小，分離范圍也會越小。目前，Sephadex填料主要用于脫鹽與緩沖液的置換，是非常經(jīng)典的一款凝膠過濾填料。

圖 Sephadex G-25脫鹽效果實(shí)驗(yàn)

· Sepharose 

Sepharose是傳統(tǒng)的偶聯(lián)瓊脂糖填料，非特異性吸附性低，回收率高。Sepharose具有非常寬闊的分離范圍，適合分離分子量大小差異大并對分辨率要求不高的樣本。

Sepharose CL系列填料由Sepharose和2,3-二溴丙醇反應(yīng)而成，增強(qiáng)了Sepharose的物理和化學(xué)穩(wěn)定性。特別適合含有機(jī)溶劑的分離，能承受較強(qiáng)的在位清洗，并可以高溫消毒，同時(shí)在流速方面也比傳統(tǒng)的Sepharose填料有了明顯的提升。

Sepharose Fast Flow填料為高度交聯(lián)的瓊脂糖填料，大大加強(qiáng)了機(jī)械性能，流速特快，適合工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)。該填料經(jīng)去電荷處理，非特異性吸附特低，回收率也得到了了提高。極高的化學(xué)穩(wěn)定性，可用多種促溶劑、有機(jī)溶劑工作及1-2M NaOH進(jìn)行在位清洗。

· Sephacryl

Sephacryl具有多種不同分離范圍的產(chǎn)品，提供了廣闊的選擇性。它不僅可以分離一般蛋白，也可以用于分離蛋白多糖、質(zhì)粒、甚至較大的病毒顆粒。而且，Sephacryl填料價(jià)格相對較低，經(jīng)濟(jì)高效，非常適合作為對實(shí)驗(yàn)成本有顧慮的客戶的第一選擇。

· Superose

Superose系列填料由高度交聯(lián)瓊脂糖構(gòu)成，具有最寬廣的分離范圍，能夠一次性分離生物大分子大小差異大的混合物。填料本身剛性好、顆粒細(xì)小并且大小分布集中，所以允許高流速的純化工作，在中、高壓層析系統(tǒng)當(dāng)中均有良好的使用效果。

· Superdex

Superdex系列是目前Cytiva產(chǎn)品中分辨率和選擇性最高的凝膠過濾填料，流速快且反壓低。此外，Superdex的化學(xué)物理穩(wěn)定性很高，可以在高粘性洗脫液 (如8 M尿素)和相對較高的流速下運(yùn)行。在常用的水性緩沖液和添加劑 (如去污劑、變性劑)中化學(xué)穩(wěn)定，并可以耐受1 M的NaOH清洗。

· Increase平臺

Increase平臺是Cytiva新一代的凝膠過濾預(yù)裝柱產(chǎn)品，專門為小規(guī)模的制備純化及分析設(shè)計(jì)。相比原有的高分辨率凝膠過濾產(chǎn)品，Increase平臺提供：

• 更高的通量，節(jié)省實(shí)驗(yàn)時(shí)間；

• 更高的分辨率，提高蛋白純度與分析數(shù)據(jù)的精度；

• 批次間差異更小，獲得更好的可重復(fù)性。